多用途分光光度計(jì)又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~380nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長(zhǎng)的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。
1、準(zhǔn)備階段:
儀器檢查與預(yù)熱:確保分光光度計(jì)的電源插座已連接,并處于待機(jī)狀態(tài)。檢查儀器是否清潔,如有污垢則使用柔軟的布輕輕擦拭儀器表面。打開分光光度計(jì)電源,讓儀器預(yù)熱15-30分鐘,使儀器穩(wěn)定。
樣品準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,選取適當(dāng)?shù)臉悠凡?zhǔn)備好。將待測(cè)樣品處理成透明的溶液,確保沒有懸浮物或氣泡。如果需要測(cè)定多個(gè)樣品,可以將它們分別裝入比色皿中。
2、校準(zhǔn)階段:
選擇波長(zhǎng):根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的波長(zhǎng)。在選擇之前,應(yīng)了解樣品的吸收峰位置和波長(zhǎng)范圍。
零點(diǎn)校準(zhǔn):將盛蒸餾水(或空白溶液、純?nèi)軇┑谋壬蠓湃氡壬笞苤械牡谝桓駜?nèi),輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí),比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。然后蓋上比色皿暗箱蓋子,轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器,使透光度T=100%,即表頭指針恰好指在T=100%處。
3、測(cè)量階段:
放置樣品:將準(zhǔn)備好的樣品裝入樣品室中,調(diào)節(jié)比色皿的位置,使其與光路對(duì)齊。
進(jìn)行測(cè)量:打開儀器軟件,在設(shè)定好的測(cè)量模式下點(diǎn)擊“開始測(cè)量”按鈕。儀器將自動(dòng)記錄樣品吸光度值,并將數(shù)據(jù)顯示在軟件界面上。
4、數(shù)據(jù)處理階段:
記錄結(jié)果:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,將測(cè)得的吸光度數(shù)據(jù)導(dǎo)出或記錄下來。在數(shù)據(jù)處理前,應(yīng)檢查數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和有效性,如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時(shí)排查錯(cuò)誤原因。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模褂煤线m的統(tǒng)計(jì)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,并得出結(jié)論。
5、關(guān)機(jī)階段:
停止測(cè)量:在實(shí)驗(yàn)完成后,點(diǎn)擊軟件界面上的“停止測(cè)量”按鈕。關(guān)閉分光光度計(jì)軟件,并將儀器恢復(fù)到待機(jī)狀態(tài)。斷開電源插頭,徹d關(guān)閉儀器。